Antagonistický účinek probiotika Sakhabactisubtil na patogeny leptospirózy – téma vědeckého článku o veterinárních vědách, přečtěte si text výzkumné práce zdarma v elektronické knihovně CyberLeninka

Abstrakt vědeckého článku o veterinárních vědách, autori vědecké práce – Neustroev M. P., Tarabukina N. P., Stepanova A. M., Parnikova S. I., Petrova S. G.

Leptospiróza zůstává naléhavým problémem ve veterinární medicíně. Používání antibiotik je omezeno možností vzniku dysbakteriózy a výskytem kmenů leptospir rezistentních na antibiotika. V současné době byla stanovena účinnost a perspektivy použití probiotik proti patogenům různých onemocnění. Vědci z Jakutského výzkumného ústavu zemědělství vyvinuli probiotikum „Sakhabaktisubtil“ na základě bakteriálních kmenů Bacillus subtilis TNP-3 a Bacillus subtilis TNP-5. Byla stanovena schopnost probiotika „Sakhabaktisubtil“ způsobit lýzu leptospir 7 sérologických skupin. Metoda může být použita ve veterinární a lékařské praxi.

Podobná témata vědecké práce ve veterinárních vědách, autorem vědecké práce je M. P. Neustroev, N. P. Tarabukina, A. M. Stepanovová, S. I. Parnikovová, S. G. Petrovová.

Epizootologický monitoring leptospirózy zvířat v Rivenské oblasti a jeho praktický význam

Charakteristika leptospirózy ve Volgogradské oblasti: biotická struktura, epizootická aktivita, epidemické projevy

Aktuální otázky epidemiologického dohledu nad leptospirózou v Irkutské oblasti
Rezistence testovacích kultur Leptospira vůči baktericidnímu léku „Argicide“

Fungicidní aktivita kmenů Bacillus subtilis proti toxigenním a plísňovým houbám

i Nemůžete najít, co potřebujete? Vyzkoušejte službu výběru literatury.

Text vědeckého článku na téma „Antagonistický účinek probiotika „Sakhabactisubtil“ na patogeny leptospirózy“

UDC 619:616.986.7:579(517.56) ANTAGONISTICKÝ ÚČINEK PROBIOTIKA „SACHABAKTISUBTIL“ NA LEPTOSPIRÓZU M.P. Neustroev, Dr. veterinárních věd, prof., N.P. Tarabukina, Dr. veterinární medicíny, prof., A.M. Stepanovová, kandidátka veterinárních věd N., S.I. Parnikova, veterinární katedra N., S.G. Petrova, veterinární katedra, A.A. Baišev, veterinární lékař n. Státní vědeckovýzkumný ústav zemědělství Ruské zemědělské akademie L.I. Ivanovová

Jakutská republikánská veterinární zkušební laboratoř

Leptospiróza – současné veterinární použití je omezeno na vývojové projevy.

zůstává problémem v medicíně. antibiotika s možností dysbakteriózy a antibiotické rezistence

kmeny leptospir. Účinnost a perspektivy použití probiotik proti patogenům různých

nemocí. Vědci z Jakutského výzkumného ústavu zemědělství vyvinuli probiotikum „Sakhabaktisubtil“ založené na bakteriálních kmenech Bacillus subtilis TNP-3 a Bacillus subtilis TNP-5. Schopnost

probiotikum „Sakhabactisubtil“ k vyvolání lýzy leptospir 7 sérologických skupin. Metoda může být použita ve veterinární a lékařské praxi.

Klíčová slova: leptospiry, séroskupiny, patogenita, lýza, bakterie

V Ruské federaci je infekčním onemocněním leptospiróza [1]

UDC 619:616.986.7:579(517.56) ANTAGONISTICKÝ ÚČINEK PROBIOTIK

„SAKHABAKTISUBTIL“ K PŮVODŮM LEPTOSPIRÓZY

Neustroev MP, Tarabukina NP, Stepanova AM Parniková SI, Petrova SG, Cand.

Dr.Vet.Sci.,Dr. Vet. Sci., Cand. Vet. Cand. Vet.

RgaG Prof. věd. věd. věd.

Baishev AA SSI YSRIA

Ivanova LI, Yakutská veterinární testovací laboratoř

Leptospiróza je naléhavým problémem veterinární medicíny. Používání antibiotik je omezeno možností rozvoje dysbakteriózy a manifestace antibiotických kmenů leptospir. V dnešní době byla nalezena účinná a slibná probiotika proti různým onemocněním. Jakutský vědecký zemědělský ústav probiotikum

„Sakhabaktisubtil“ na bázi kmenů bakterií Bacillus subtilis TNP-3 a Bacillus subtilis TNP-5. Byla prokázána schopnost probiotika „Sakhabaktisubtil“ způsobit lýzu leptospir 7 séroskupin. Metoda může být použita ve veterinární a lékařské praxi.

Klíčová slova: Leptospiry, séroskupiny, patogenita, lýza, bakterie

běžná hospodářská a divoká zvířata Leptospiróza v Republice Sakha (Jakutsko)

je registrován od roku 2003 [2] a v současnosti je rozšířený, zejména u koní chovaných ve stádech.

Podle současných pokynů jsou při diagnóze leptospirózy nemocná zvířata izolována a léčena antibiotiky a poté očkována.

Je známo, že užívání antibiotik způsobuje střevní dysbakteriózu, snižuje imunobiologickou reaktivitu a imunogenicitu vakcíny a přispívá ke vzniku

kmeny leptospir rezistentní na antibiotika [3]. Zjistili jsme, že leptospiry séroskupin: Pomona, Tarassovi, Grippotiphosa, Hebdomadis, Sejroe, Icterohaeorrhagiae. Canicola nejsou citlivé na amoxiclav, ampicilin, gentamicin, chloramfenikol, nefazolin, nefotoxim, ceftriaxon a erythromycin. Tyto séroskupiny leptospir jsou citlivé pouze na bicilin-5 a doxycyklin. Proto je při předepisování antibakteriálních látek nutné nejprve stanovit citlivost patogenu leptospirózy na antibiotika.

Vyvinuli jsme lék „Sakhabactisubtil“ na bázi bakteriálních kmenů Bac. subtilis TNP-3 a Bac. subtilis TNP-5. Léčivo je registrováno v Ruské federaci. Návod k použití při dysbakterióze zvířat byl schválen (2006, 2012).

Bakteriální kmeny Bac. subtilis TNP-3 a Bac. subtilis TNP-5 mají výraznou antagonistickou aktivitu proti oportunním a patogenním mikroorganismům (salmonelóza, E. coli, brucella, mykobakterie, houby) a stimulují mikrobiocenózu prospěšné mikroflóry (bifido- a laktobacily atd.).

Byla stanovena účinnost a perspektivy probiotika „Sakhabactisubtil“ při přípravě krmiv (siláž, senáž), prevenci a léčbě hnisavě-nekrotických ran, onemocnění dýchacího systému, trávení, reprodukce, mykotoxikózy, zvýšení imunobiologické reaktivity organismu, normalizaci mikrobiocenózy zvířat, jako součást vitamínových doplňků, získávání vysoce kvalitních produktů a výrobě ekologicky šetrných hnojiv z hospodářských zvířat a rostlinného odpadu, jako bakteriální hnojiva pro zvýšení úrodnosti permafrostových půd a výnosů plodin, jako konzervační prostředek při přípravě sena, siláže a senáže. Mohou být použity k obnově půd kontaminovaných ropou a v lékařské praxi [4]. Neexistují však žádné informace o použití bakterií Bacillus subtilis TNP-3 a Bacillus subtilis TNP-5 k boji proti leptospiróze u zvířat a lidí.

Na základě výše uvedeného je cílem studovat antagonistické vlastnosti probiotika „Sakhabactisubtil“ ve vztahu k různým séroskupinám leptospir.

Materiály a metody

Jako mikrobiální přípravek byl použit probiotikum „Sakhabactisubtil“. Jedná se o rovnocennou kombinaci bakteriálních kmenů „Bacillus subtilis TNP-3-DEP“ a „Bacillus subtilis TNP-5-DEP“ uložených ve sbírce mikroorganismů Všeruského státního institutu pro kontrolu, normalizaci a certifikaci veterinárních léčiv (certifikáty o uložení ze dne 6. února 2001, č. 180/15 č. 181/15).

Bakteriální kmeny „Bacillus subtilis TNP-3“ a „Bacillus subtilis TNP-5“ byly kultivovány na maso-peptonovém agaru (pH 7,0–7,2) po dobu 5–7 dnů při 370 °C, poté suspendovány ve stejných poměrech v

fyziologický roztok chloridu sodného o koncentraci 5×108⁻ CFU v 1 ml; kmeny leptospir séroskupin: Pomona, Tarassovi, Grippotiphosa, Hebdomadis, Sejroe, Icterohaeorrhagiae, Canicola (z diagnostické soupravy) byly kultivovány v Uhlenhuthově médiu po dobu 1015–28 dnů při 300–5 °C do koncentrace 104×1⁻⁴ CFU v XNUMX ml.

Do zkumavek byl přidán 1 ml kultury různých séroskupin leptospir (3 zkumavky pro každou sérologickou skupinu) a suspenze bakteriálních kmenů „Bacillus subtilis TNP-3-DEP“ a „Bacillus subtilis TNP-5-DEP“ byla přidána ve stejných poměrech v dávce 1 ml.

Kontrola: Do zkumavek s kulturou séroskupin leptospir byl přidán 1 ml sterilního fyziologického roztoku.

Výsledky byly zaznamenány po 12 dnech inkubace při teplotě 28–300 °C. Stěry byly mikroskopicky vyšetřeny v tmavém poli při zvětšení 40×7–10.

Suspenze bakteriálního kmene Bac. subtilis TNP-3 způsobuje úhyn 10–40 % různých séroskupin leptospir. Suspenze bakteriálního kmene Bac. subtilis TNP-5 potlačuje životaschopnost všech séroskupin leptospir. Léčivo „Sakhabactisubtil“, sestávající ze stejné kombinace bakteriálních kmenů Bac. subtilis TNP-3 a Bac. subtilis TNP-5, způsobuje úplnou lýzu všech skupin leptospir (tabulka).

Ve zkumavkách bez suspenze kultury bakteriálních kmenů „Bacillus subtilis“ byly pozorovány živé leptospiry, tj. životaschopnost leptospir všech séroskupin byla zachována.

Probiotikum „Sakhabactisubtil“, sestávající ze stejné kombinace bakteriálních kmenů „Bac. subtilis TNP-3-DEP“ a „Bac. subtilis TNP-5-DEP“ (5×108 CFU ml), v živném médiu potlačuje životaschopnost a způsobuje lýzu patogenních leptospir 7 sérologických skupin.

Tabulka. — Vliv kmenů Bacillus subtilis na životaschopnost leptospir

č. Leptospira séroskupiny Kontrola TNP-3 TNP-5 “Sakhabaktisubtil”

1 Pomona 100 % 40 % lýza lýza

2 Tarassovi 100% 20% lýza lýza

3 Grippotiphosa 100 % 20 % lýza lýza

4 Hebdomadis 100% 40% lýza lýza

5 Sejroe 100 % 40 % lýza lýza

6 Ikterohaeorhagie 100 % 10 % lýza lýza

7 Canicola 100 % 40 % lýza lýza

Laboratorní studie prokázaly rezistenci bakteriálních kmenů Bac. subtilis TNP-3 a Bac. subtilis TNP-5 vůči široké škále antibiotik (kanamycin, rifampicin, chloramfenikol, furodoxin, ampicilin, neomycin, eryprim a kinoex), nízkou rezistenci vůči cefuroxinu, cefatoxinu, ciroperasinu, gentamicinu a citlivost vůči ciprofloxacinu.

Rezistence probiotika „Sakhabactisubtil“ na širokou škálu antibiotik proto naznačuje možnost jeho použití v kombinaci s nimi.

Testování probiotik na infekční onemocnění, včetně leptospirózy, je obzvláště důležité vzhledem k přistoupení Ruska k WTO. Je známo, že evropské země zavádějí omezení používání antibiotik v chovu zvířat.

Metoda potlačení životaschopnosti a lýzy patogenních leptospir může být využita ve veterinární a lékařské praxi pro vývoj probiotických přípravků jako terapeutických a profylaktických činidel a pro dezinfekci objektů životního prostředí při leptospiróze.

Na základě výsledků výzkumu byla podána žádost o vydání patentu Ruské federace na vynález „Způsob potlačení životaschopnosti patogenních leptospir“.

1. Volkov, N.A. Epizootická situace u řady infekčních chorob zvířat se prudce zhoršila /N.A. Volkov // Vetkorm, 2010. – č. 5. – s. 6-7.

2. Glaskovich, M.A. Vliv krmných antibiotik na střevní mikrobiocenózu hospodářských zvířat: stručný analytický přehled /M.A. Glaskovich, E.A. Kapitonova // Vědecké poznámky UO VGAVM, 2010. – Sv. 46. – Číslo 1, část 1. – S. 194-197.

3. Makarova, L.I. Problémy leptospirózy u hospodářských zvířat v Republice Sacha (Jakutsko) / L.I. Makarova, A.A. Nikitina // Sobotní zprávy z Mezinárodní vědeckoprakt. konference. Moderní problémy a inovativní trendy v rozvoji zemědělské vědy (Jakutsk, 10. listopadu 2010), Jakutsk, 2010. – s. 54-56.

4. Neustroev, M.P. Probiotika z bakteriálních kmenů Bacillus subtilis v zemědělství / M.P. Neustroev, N.P. Tarabukina, M.P. Fedorova // Jakutsk, 2012. – 16 s.

Od roku 1997 pracovala na klinikách v Moskvě a Moskevské oblasti, z asistentky se stala vedoucí lékařkou. Posledních 8 let pracuje na klinice Radenis (Solnechnogorsk, Zelenograd). Od roku 2018 vyučuje veterinární stomatologii na Univerzitě RUDN. Expert Národní veterinární komory v oboru stomatologie.

V přírodě existuje mnoho různých infekcí, které jsou nebezpečné nejen pro domácí mazlíčky, ale i pro lidi, a jednou z nich je leptospiróza. O této nemoci, jejích diagnostických metodách, léčbě a prevenci si povíme podrobněji v článku.

Leptospiróza u psů: o jaký druh onemocnění se jedná?

Leptospiróza je infekční přirozené ohniskové onemocnění způsobené bakteriemi rodu Leptospira. Existuje asi 200 druhů, nazývaných sérotypy. Jsou rozšířené na Zemi, s výjimkou Arktidy. V Rusku existuje šest sérotypů této bakterie: jejich oblast rozšíření zahrnuje všechny oblasti středního pásma.

Za hlavní přenašeče leptospirózy jsou považováni hlodavci a drobní hmyzožravci (rejsci, ježci), kteří spolu s močí uvolňují infekční agens do životního prostředí. K onemocnění jsou náchylná i divoká kožešinová zvířata, hospodářská zvířata a lidé.

Leptospiry se nerozmnožují mimo své hostitele, ale zůstávají životaschopné ve vnějším prostředí až šest měsíců. Teplé a vlhké podmínky jsou pro ně obzvláště příznivé, proto se často vyskytují ve vlhké půdě a stojatých vodních plochách (kaluže, rybníky, bažiny a jezera). Bakterie hynou při vystavení přímému slunečnímu záření, vyschnutí, při teplotách nad 76 °C nebo při ošetření dezinfekčními prostředky.

Během infekčního procesu bakterie vstupují do krve potenciálního nosiče a poté pronikají do vnitřních orgánů (játra, slezina, ledviny a nadledviny), kde se začnou aktivně množit.

Po rozmnožení dochází k sekundární infekci: mikroorganismy napadají buňky jater, ledvin, nadledvin, mozkové membrány, svalové tkáně a také endotel kapilár (cévní stěny). V důsledku toho se zvyšuje propustnost cév a dochází k hemoragickému syndromu, který se projevuje krvácením sliznic a kůže.

Ve veterinární medicíně existují dvě hlavní formy leptospirózy:

• Žloutenka — nejčastěji diagnostikováno u štěňat a mladých psů mladších 2 let. Tato forma onemocnění se vyznačuje zežloutnutím sliznic a viditelných oblastí kůže v důsledku dysfunkce jater a zvýšenou hladinou bilirubinu (žlučového barviva) v krevním séru.
• Hemoragické (anikterické) — je registrován hlavně u dospělých a starších osob. Hemoragický syndrom se objevuje 2–3 dny po nástupu akutní fáze onemocnění: domácí mazlíčci mají krvácející sliznice, podkožní krvácení, stopy krve v moči a stolici.

Leptospiróza u psů může mít různý průběh:

• Akutní — inkubační doba je minimální, onemocnění se rozvíjí rychle a během 2–5 dnů vede k těžkému stavu. U této formy infekce je prognóza obecně nepříznivá, je vysoká úmrtnost (zejména u štěňat a dospělých jedinců s oslabenou imunitou).
• Subakutní — příznaky jsou méně výrazné než u akutního průběhu. Onemocnění se vyvíjí pomalu, trvá 10–15 dní. Prognóza je také nepříznivá, pravděpodobnost úmrtí zůstává vysoká.
• Bezpříznakové — je charakterizován téměř úplnou absencí klinických příznaků. Mohou se objevovat periodicky a jsou slabé povahy.

Také alokovat chronická leptospiróza u psů – když zvířata po úplném uzdravení zůstávají nositeli bakterií, které ji vyvolávají.

Jak psi dostávají leptospirózu?

Leptospiry se do těla dostávají přes sliznice trávicích orgánů a otevírají rány na kůži. Nejčastěji k infekci dochází následujícími způsoby:

• Kontakt — při komunikaci s nemocnými příbuznými, kontaktu s povrchy a předměty kontaminovanými močí nakažených domácích mazlíčků (například v běžných prostorách pro chůzi) a také při koupání ve vodní ploše, ve které žije leptospiróza.
• Zažívací — konzumací masa nebo mléka nakažených hospodářských zvířat, konzumací odchycených hlodavců, pitím vody z louže nebo jiné stojaté vodní plochy.
• Přenosné – při kousnutí infikovaným hmyzem.

Inkubační doba leptospirózy u psů je v průměru 5 až 14 dní: její trvání závisí na stabilitě imunitního systému a funkčním stavu těla.

Přenáší se leptospiróza u psů na člověka?

Leptospiróza je antropozoonotické onemocnění, což znamená, že je nebezpečná jak pro zvířata, tak pro lidi. Případy infekce lidí od psů jsou extrémně vzácné, ale pokud byla u vašeho domácího mazlíčka tato nemoc diagnostikována, je nutné přísně dodržovat preventivní opatření a osobní hygienu a během léčby omezit hmatový kontakt s ním na minimum. V místnosti, kde se nemocný pes nacházel nebo nachází, je nutné pravidelně provádět mokré čištění pomocí dezinfekčních prostředků pro domácnost.

Příznaky a příznaky leptospirózy u psů

Klinické příznaky onemocnění jsou nespecifické a mohou se projevovat odlišně v závislosti na sérotypu leptospiry, která vstoupila do těla, a také na dalších faktorech. Obvykle se vyvíjí následující symptomatický obraz:

• Fyzická aktivita psa se snižuje, jeho stav se stává letargickým a depresivním;
• Domácí mazlíček odmítá jíst;
• Tělesná teplota stoupá na 40-42 °C;
• Objevují se trávicí poruchy (nevolnost, zvracení, průjem);
• Je pozorována zvýšená žízeň (polyurie). V důsledku toho zvíře začne častěji močit;
• Moč se zbarví do tmavě hněda;
• Sliznice a kůže získávají nažloutlý odstín;
• Objevují se příznaky hemoragického syndromu (krvácení sliznic, modřiny na kůži, stopy krve ve stolici);
• Vyvíjejí se poruchy ve fungování centrálního nervového systému: křeče, svalový třes a zhoršená koordinace pohybů.

Pokud u svého psa zaznamenáte jeden nebo více z uvedených příznaků, poraďte se s veterinářem.

Diagnostika leptospirózy u psů

K diagnostice této infekce používají veterinární specialisté následující metody:

• Užívání anamnézy dotazem majitele.
• Vizuální kontrola psi.
• Odebírání obecných klinických a biochemických krevních testůNepřímým důkazem přítomnosti leptospirózy budou takové ukazatele, jako je snížený počet krevních destiček, anémie, vysoké hladiny AST, ALT, celkového bilirubinu, což naznačuje poškození a dysfunkci jater. Ve prospěch této diagnózy hovoří také markery akutního selhání ledvin: vysoká koncentrace kreatininu a močoviny v séru, nedostatek sodíku, draslíku a chloru, zvýšený obsah fosforu.
• PCR testování — umožňuje detekovat přítomnost protilátek v moči nebo krvi, což je známka infekce. Tato metoda se však nepovažuje za spolehlivou, protože může dát falešně negativní výsledek: například pokud od infekce uplynula krátká doba a tělo nemělo čas vytvořit protilátky.

Mikroskopie moči nemocného zvířete — umožňuje detekovat patogen v odebraném vzorku, což je zároveň základem pro stanovení diagnózy.

Léčba leptospirózy u psů

Antibiotika (obvykle na bázi doxycyklinu a streptomycinu) se používají k léčbě infekcí způsobených leptospirózou. Veterinární lékař určí, jak leptospirózu u psů léčit, na základě závažnosti onemocnění a sérotypu bakterií, které se do těla dostaly.

Antibakteriální léky k léčbě leptospirózy u psů se obvykle předepisují na dobu nejméně dvou týdnů. Je žádoucí, aby byli nakažení jedinci během této doby hospitalizováni, aby se zabránilo nákaze majitelů a přenosu infekce na další domácí mazlíčky.

Kromě toho je psům předepsána symptomatická terapie, která může zahrnovat:

• Parenterální podávání živných roztoků v případě úplného odmítnutí potravy;
• Infuzní terapie k prevenci dehydratace, detoxikaci těla a obnovení elektrolytové rovnováhy;
• Užívání hemostatických léků k obnovení normální srážlivosti krve;
• Užívání antiemetik, antipyretik, léků proti bolesti atd.

V obzvláště závažných případech se domácí mazlíčci podrobují hemodialýze (čištění krve od toxinů pomocí speciálního zařízení) nebo krevní transfuzi.

Výživa pro psy s leptospirózou

Během akutního stádia onemocnění psi nemají chuť k jídlu, proto je veterinární specialisté převádějí na parenterální výživu (podávání speciálních roztoků pomocí kapátek).

Během rekonvalescence se pro zvířata vybírá speciální dieta (veterinární dieta). Výběr terapeutického krmiva závisí na tom, které orgány byly během onemocnění nejvíce postiženy. Nejčastěji jsou při leptospiróze narušeny funkce ledvin a jater, proto se domácím mazlíčkům zobrazuje krmivo se sníženým obsahem bílkovin a speciálním minerálním složením.

Po úplném uzdravení se doporučuje převést psy na kompletní a vyváženou stravu. K tomu je vhodné mokré i suché krmivo Purina ONE ®. Jsou vyvinuta veterináři a nutričními specialisty Purina®, vyrobena z vysoce kvalitních surovin a mají vyvážené složení živin, vitamínů a minerálů, takže dokáží tělu mazlíčka poskytnout vše, co potřebuje k udržení zdraví a aktivity.

Prevence

Nejspolehlivějším preventivním opatřením proti tomuto onemocnění je očkování. Vakcína proti psí leptospiróze se štěňatům podává ve věku 8 týdnů a druhá vakcinace se provádí za 2–4 týdny. Doporučuje se každoroční revakcinaci dospělých zvířat: k tomuto účelu se obvykle používají monovalentní a polyvalentní vakcíny proti psí leptospiróze zahraniční nebo domácí výroby, dostupné na ruském trhu. V oblastech s nepříznivým výskytem leptospirózy veterináři doporučují revakcinaci psů každých 6 měsíců.

Abyste snížili riziko nakažení vašeho psa leptospirózou, kromě očkování dodržujte také následující preventivní opatření:

• Vyhýbejte se místům, kde se v těsné blízkosti chovají domácí mazlíčci;
• Vyhýbejte se kontaktu svého psa s toulavými psy a divokými zvířaty; nedovolte svému psovi lovit hlodavce;
• Nedovolte svému mazlíčkovi pít vodu z kaluží, jezer, rybníků, ani se v nich koupat či plavat během venčení.

Pokud si všimnete podezřelých změn v chování a zdraví zvířete, okamžitě vyhledejte kvalifikovanou veterinární pomoc. Nezapomeňte, že účinná léčba leptospirózy u psů doma je nemožná. Jedná se o nebezpečné onemocnění a čím dříve s ním začnete bojovat, tím vyšší je šance psa na rychlé uzdravení a plnohodnotný budoucí život.