Proč jsou žížaly nebezpečné?
Prostředí je hlavním zdrojem nákazy člověka, každoročně se v něm hromadí velké množství invazivního materiálu. Pro člověka jsou nebezpečná především vajíčka toxocara, která roznášejí kočky a psi. Žížaly žijící v půdě mohou působit jako parateničtí hostitelé a hromadit larvy Toxocara. Poprvé v Rusku byla experimentální infekce žížal Eisenia fetida provedena prostřednictvím půdy naočkované 10000 92 invazivními vajíčky Toxocara cati. Poprvé ve světové praxi byla stanovena migrace a doba pobytu larev Toxocara cati v tkáních žížal. Larvy Toxocara cati vycházející z vajíček byly zaznamenány v kožním svalovém vaku a ve střevě. V průběhu 50 dnů jsme u žížal pozorovali larvy. V kožním svalovém vaku nebyly larvy Toxocara cati nalezeny u všech červů, ale pouze v XNUMX % případů. Ve střevech byly larvy zaznamenávány v životaschopném stavu po celou dobu experimentu. V kontaminované půdě jsou žížaly schopny akumulovat infekční larvy T. cati ve střevech.

paratenismus
infekční vajíčka
žížaly
Eisenia fetida
Tohosaga sati
toxokaróza
1. Malysheva N.S., Samofalova N.A., Plekhova N.A., Borzosekov A.N. Parazitologické hodnocení kvality biotopu v urbanizovaných oblastech regionu Kursk // Teorie a praxe boje proti parazitárním chorobám: materiál. zpráva vědecký, konf. M., 2009. – Číslo 10. – S. 255-257.
2. Postnová V.F., Shendo G.L. a další Posouzení epidemiologického významu půdy při toxokaróze // Teorie a praxe boje proti parazitárním chorobám: materiál. zpráva vědecký, konf. M., 2009. – Číslo 10 – S. 304-306.
3. Tumolskaja N.I., Sergiev V.P., Lebedeva M.N. a další. Klinika. Diagnostika. Zacházení. Prevence. – M., 2004. – 48 s.
4. Engbæk, K. a kol. (1984) Průzkum helmintů u toulavých koček z Kodaně s ekologickými aspekty. Z. Parasitenkd. 70, 87 – 94.
5. Fisher, Maggie, 2003. Toxocara cati: podceňovaný původce zoonózy. J Parasitol 19:167–170.
6. Galvin, TJ, 1964. Experimentální infekce Toxocara canis u kuřat a holubů. J Parasitol 50: 124–127.
7. Nichols, R. L., 1956. Etiologie viscerální larvy migrans. I. Diagnostická morfologie infekčních larev Toxocara druhého stadia. J Parasitol 42: 349–362.
8. Okoshi, S. a Usui, M., 1968. Experimentální studie na Toxascaris leonina. IV. Vývoj vajíček tří ascaridů, T. leonine, Toxocara canis a Toxocara cati, u psů a koček. Jpn. J. Vet. Sci., 30:29-38..
9. Okoshi, S. a Usui, M., 1968. Experimentální studie na Toxascaris leonina vi. Experimentální infekce myší, kuřat a žížal Toxascaris leonina, Toxocara canis a Toxocara cati. Jpn. J. Vet. Sci., 30: 151-166.
10. Oshima, T., 1961. Standardizace technik pro infekci myší Toxocara canis a pozorování normálních migračních cest larev. J Parasitol 47: 652–656.
11. Petithory, JC a kol., 1993. Imunologické studie na očních larvách migrans. Toxocara and Toxocariasis: Clinical, Epidemiological and Molecular Perspectives (Lewis, JW, Maizels, RM, et al. eds.), pp. 81-89, Britská společnost pro parazitologii s Institute of Biology.
12. Sarles, MP a Stoll, NR, 1935. O odolnosti kočky vůči superponované infekci Ascarid, Toxocara cati. J Parasitol 21:277–291.
13. Sprent, J. F. A., 1955. O napadení centrálního nervového systému háďátky II. Invaze do nervového systému u ascariázy. Parazitologie, 45: 41-55.
V posledních desetiletích se biologické znečištění životního prostředí hlístovými vajíčky u domácích zvířat stalo hlavním ekologickým problémem v megaměstech.
Při parazitologickém posouzení 570 vzorků vody na urbanizovaném území regionu Kursk obsahovalo 151 vzorků (26,5 %) cysty Giardia, oocysty Cryptosporidium, vajíčka Ascaris a Toxocara. Počet detekovaných patogenů na vzorek byl 6,2 vzorků. V pitné vodě byla nalezena vajíčka Ascaris, Toxocara a cysty labli (357 vzorků) – 2,9 kopií. pro testování. Výsledky parazitologických studií 1258 vzorků půdy a písku prokázaly přítomnost patogenů parazitóz v 511 (40,6 %) případech. V půdách byla nalezena vajíčka toxocary, škrkavek a bičíkovců. Kontaminace půd z rekreačních oblastí byla 59,5 % a kontaminace pískem z hřišť obytných domů 49 %. V průměru bylo zaznamenáno 3,5 až 8,6 patogenů na vzorek půdy a 1,6 až 8,6 vzorků písku. [1]. Kontaminace půdy vajíčky Toxocara v oblasti Astrachaň se každým rokem zvyšuje. V roce 2004 byla vajíčka Toxocara nalezena v 6,6 % vzorků, v roce 2008 – 10,8 % [2].
Jakmile jsou vajíčka a larvy některých živočišných háďátek v lidském těle, mohou v něm projít ranými stádii vývoje. Toxokaróza je jedním z těchto onemocnění.
Toxokaróza je parazitární onemocnění zvířat i lidí. Původcem toxokarózy je háďátko z čeledi Anisakidae (Skrjabin et Korokhin, 1945) rodu Toxocara (Stiles, 1905). Jedním z původců tohoto onemocnění je Toxocara mystax (Zeder, 1800) nebo Toxocara cati – – – helmint z čeledi koček.
Larvy toxocara mohou být lokalizovány v různých lidských orgánech a tkáních: játra, ledviny, plíce, štítná žláza, mozek, oči, svaly atd. V těchto orgánech zůstávají larvy životaschopné po mnoho let a periodicky, pod vlivem různých faktorů, obnovit migraci, což způsobí recidivu onemocnění. Během procesu migrace larvy helmintů poškozují tkáně, způsobují krvácení, zánětlivé reakce, nekrózy a alergické reakce [3]. Role Toxocara canis v lidské patologii byla prokázána, ale stále se diskutuje o roli T. mystax.
Dnes však existují důkazy, že invazivní vajíčka Toxocara cati představují pro člověka nebezpečí. Vědci z Velké Británie prokázali účast larev tohoto typu hlístic na lidské infekci oční a viscerální toxokarózou, navíc byly v játrech jednoho pacienta nalezeny larvy Toxocara cati [5, 11].
Hlavním zdrojem infekce pro člověka jsou kočky, které vylučují vajíčka Toxocara cati spolu s výkaly, což má za následek další znečištění životního prostředí. Vzhledem k tomu, že vajíčka Toxocara jsou velmi odolná vůči nepříznivým podmínkám prostředí, dochází v přírodě k hromadění invazního materiálu.
Prevalence Toxocara u koček a jejich role v šíření infekce mezi lidmi byla málo studována. Procento infekce Toxocara cati u koček může být velmi vysoké. Například v Dánsku bylo toxocarou infikováno 79 % toulavých koček, ve Spojeném království bylo infikováno 91 % toulavých koček [5]. Toulavé kočky jsou nebezpečným zdrojem vajíček Toxocara, protože zahrabávají exkrementy do půdy a tím pronikají do prostředí (pískoviště, záhony).
Je tedy nutné další studium Toxocara cati, protože Kontrola tohoto parazita má velký význam pro lidské zdraví. Infekce člověka se může objevit přirozeně v důsledku pozření vajíček parazitů, existuje také možnost infekce konzumací paratenického hostitele (brouk, žížala). Zvláštní rizikovou skupinou jsou děti, které si často olizují špinavé ruce a mohou jíst i bezobratlé (žížaly).
Prostředí je hlavním zdrojem infekce vajíček Toxocara cati pro člověka a může být i hlavním rezervoárem invazivních vajíček Toxocara cati, navíc se na šíření těchto parazitů významně podílejí i drobní savci [4]. Paratenický (rezervoárový) hostitel Toxocara sp. mohou to být hlodavci, prasata, ovce, ptáci, žížaly. K dalšímu rozvoji patogenu dochází, pokud paratenického hostitele sežere kočka nebo jiný definitivní hostitel. Lidé také působí jako paratenický hostitel, ale nejsou zahrnuti do cyklu přenosu infekce, což je biologická slepá ulička pro parazita.
Informace o žížalách jako paratenických hostitelích Toxocara cati jsou velmi vzácné. Ve světové praxi zůstává otázka účasti žížal v životním cyklu Toxocara cati málo prozkoumaná. Japonští vědci S. Okoshi a M. Usui [9] infikovali žížaly Eisenia fetida invazivními vajíčky Toxocara cati a poté jimi krmili hlodavce a kuřata, aby zajistili možnost infekce dalšího paratenického hostitele. Nebyly provedeny žádné další studie o infekci žížal invazivními vajíčky Toxocara cati, takže o relevanci studií není pochyb.
Účelem studie je zjistit lokalizaci larev Toxocara cati u žížal druhu Eisenia fetida. Určete dobu pobytu larev v kožním svalovém vaku a střevech žížal.
Materiál a metody. Vajíčka T. cati byla získána z pitvy 15 dospělých samic háďátek. Výsledná vaječná suspenze byla umístěna do Petriho misek s 0,1 normálním roztokem kyseliny sírové a kultivována v termostatu při teplotě 28 ± 1 °C po dobu 4 týdnů. Pro stanovení invazivity vajíček byl dvakrát proveden biologický test na laboratorních myších. K nalezení larev u myší byla použita metoda stlačování jater a trávení svalů v umělé žaludeční šťávě [6]. Larvy byly identifikovány metodou RL Nicholse [7] a JFA Sprenta [13].
Žížaly (Eisenia fetida) byly chovány v plastových válcích naplněných půdním humusem o hloubce 10 cm při pokojové teplotě. Před zahájením experimentu bylo náhodně vybráno 10 žížal, které byly trichinoskopicky vyšetřeny k detekci larev Toxocara získaných červy v přirozených podmínkách.
70 žížal, přibližně stejně velké, bylo rozděleno do dvou skupin: 50 (skupina 1) a 20 (skupina 2 – kontrola). Byly umístěny do samostatných plastových válců naplněných 150 g půdy. Půda pro infekci byla naočkována 10000 10 infekčními vajíčky T. cati a směs byla důkladně promíchána. Dávka infekčních larev ve vejcích byla vypočtena ve vodné suspenzi podle metody T. Oshimy [1]. Žížaly ze skupiny 4 byly drženy v této půdě po dobu 2 dnů při pokojové teplotě. Červi ze skupiny XNUMX byli chováni jako kontrolní skupina s nekontaminovanou půdou.
Poté, co byly přirozeně infikovány infekčními vajíčky prostřednictvím kontaminované půdy, byly žížaly ze skupiny 5 přemístěny do čisté půdy (po jejich umytí, aby se zabránilo dalšímu kontaktu s vajíčky). Experiment trval 1 dní. Postupná pitva červů byla provedena jak ze skupiny 92, tak ze skupiny 1. Nejprve byli fixováni v 2% formaldehydu, poté byli otevřeni na břišní straně, střeva byla oddělena od kožního svalového vaku a prohlíženy v kompresory pro trichineloskop MIS-1 pod mikroskopem Micromed 7 var . 3-3. Larvy byly zaznamenány v přední, střední a zadní části kožního svalového vaku červa nebo střeva. Použili jsme novou metodu počítání larev ve střevech.
Výsledky a diskuse. Počínaje 13. dnem inkubace vajíček se v kultuře začala objevovat vajíčka s larvami, která však nebyla invazivní. Biologický test na myších byl proveden dvakrát. Poprvé, 17. den inkubace, byl výsledek negativní. Larvy toxocara nebyly nalezeny ani v játrech, ani po strávení v umělé žaludeční šťávě. Invazivní larvy Toxocara mají „čepici“ na předním konci těla – oddělení kutikuly. 29. den inkubace se u larev vyvinula „čepice“. 30. den inkubace byl proveden druhý biologický test na myších, který potvrdil invazivitu larev. Během lisování nebyly v játrech myší nalezeny žádné larvy. Byly objeveny poté, co byly svaly stráveny v umělé žaludeční šťávě. Za stejných kultivačních podmínek byl vývoj vajíček v Petriho misce nerovnoměrný, ale do 5. týdne kultivace byly u 80 % vajíček pozorovány pohyblivé a plně vytvořené larvy.
Podle MP Sarlese a NR Stolla [12] se vajíčka T. cati stávají invazivními po 3–4 týdnech při pokojové teplotě. Podle výsledků studií S. Okoshi a M. Usui [8] se při teplotě 30°C stávají invazivními po 11 dnech, při 25°C po 16 dnech a po 21 dnech při pokojové teplotě. Vajíčka jsme inkubovali při teplotě 28 ± 1°C. Vejce se stala infekční po 4 týdnech 29. den. Delší inkubační dobu vajíček lze v našem případě vysvětlit různými způsoby získávání vajíček. Vajíčka jsme odebírali z dělohy pohlavně dospělých samic Toxocara, nikoli z trusu, kde jsou vajíčka již připravena k vývoji, jako u výše uvedených autorů.
V kontrolní skupině nebyly po celou dobu experimentu nalezeny žádné žížaly. V experimentální skupině byly larvy Toxocara cati vylézající z vajíček zaznamenány v kožním svalovém vaku a ve střevě. V průběhu 92 dnů jsme u žížal pozorovali larvy. Za celou dobu experimentu byli pouze dva červi bez larev.
V kožním svalovém vaku nebyly larvy Toxocara cati nalezeny u všech červů, ale pouze v 50 % případů. Častěji byly larvy lokalizovány ve střední a zadní části kožního svalového vaku, většina larev byla nehybná. V přední části kožního svalového vaku byly na začátku pokusu zaznamenány larvy pouze u 2 červů (1-3 larvy). Ve střední části červa byly larvy zaznamenány častěji – v 50% případů (1-4 larvy). V zadní části kožního svalového vaku byly larvy identifikovány v 37,5 % případů (1-4). Larvy lokalizované v kožním svalovém vaku byly v 50 % případů nepohyblivé. Průměrný počet larev ve svalech červa byl 1,9±0,35.
Nejvíce larev se nachází ve střevech žížal Eisenia fetida. Larvy se nacházely houfně, nejčastěji ve střední části. Během experimentu bylo ve střevě zaznamenáno 1 až 30 larev s průměrem 7,0 ± 1,6. Uvážíme-li, že střeva žížaly jsou osvobozena od potravy do 3 dnů, pak je mechanismus nalezení larev ve střevech ještě nejasnější. Zřejmě se tam živí larvy Toxocara, protože mírně zvětšit velikost. Tuto skutečnost zaznamenali japonští badatelé S. Okoshi a M. Usui [9] a zaznamenali jsme ji i my. Průměrný počet larev, které jsme u žížal během experimentu našli, byl 10,1±2,8. Navíc pokles počtu larev byl detekován až na konci třetího měsíce (obrázek 1). U dvou červů otevřených 71. den pokusu bylo nalezeno 2 a 31 živých larev.

Obr.1. Průměrný počet larev Toxocara cati u žížal
Larvy toxocary si často vybírají teplokrevné živočichy jako rezervoárové hostitele, ve kterých mohou zůstat v životaschopném stavu až 6-10 let, aniž by byly pokryty tobolkou. Žížaly takové nejsou, nicméně larvy Toxocara cati žijí v jejich střevech v životaschopném stavu až tři měsíce, když vylézají z vaječných skořápek.
27. den pokusu byl v kontaminované půdě nalezen 1 červ Eisenia fetida. Během jeho studie bylo zjištěno, že ve střední části kožního svalového vaku byla pouze 1 nehybná larva a ve střevě bylo nalezeno 62 životaschopných larev Toxocara.
Závěry. Inkubace vajíček Toxocara cati při teplotě 28 ± 1 °C pokračovala po dobu 4 týdnů. Infekční vajíčka T. cati, která se přirozeně dostala do žížal Eisenia fetida, se vynořují z vaječných membrán ve střevě a mohou zůstat v životaschopném stavu po dobu až tří měsíců (92 dní). Jednotlivé larvy napadají střední a zadní část kožního svalového vaku v 50 % případů. Zhruba polovina larev se tam znehybní. Celkově byl průměrný počet larev v této části červa 1,9 ± 0,35. Ve střevech byly po celou dobu experimentu zaznamenány larvy v životaschopném stavu, v průměru 7,0±1,6 (1-30) larev. Počet larev u žížal během experimentu trvajícího 92 dní byl v průměru 10,1±2,8. V kontaminované půdě jsou žížaly schopny akumulovat infekční larvy T. cati ve střevech.
Recenzenti:
Mashkin V.I., doktor biologických věd, profesor katedry nauky o zvěři a biologie volně žijících zvířat, Vjatka státní zemědělská akademie, Kirov;
Filatov A.V., doktor veterinárních věd, profesor katedry hygieny zvířat, fyziologie a biochemie, Vjatka státní zemědělská akademie, Kirov.