FS.2.5.0050.15 Plody borůvky obecné –

Vnější znaky. Celá surovina. Plody jsou bobule o průměru 3-6 mm, beztvaré, silně vrásčité, při nasáknutí kulovité. Na vrcholu plodu je viditelný zbytek kalichu v podobě malého prstencového lemu obklopujícího oteklý kotouč se zbytkem sloupku uprostřed nebo s malou prohlubní, kde odpadl. V dužnině plodu se nachází četná (až 30 kusů) semena, hnědá, nejasně velkooká, stlačená ze stran a podél hřbetu konvexní. Na bázi plodu je někdy krátká stopka.

Barva povrchu plodu je černá s načervenalým odstínem, matná nebo mírně lesklá; dužnina je červenofialová; semena jsou červenohnědá. Vůně je slabá. Chuť vodného extraktu je kyselo-svíravá.

Mikroskopické znaky. Buňky epidermis plodu jsou seskupeny a od sebe odděleny silnějšími buněčnými stěnami (fenestrický typ).

Epidermis plodu (400×).

A – Epidermis disku; B – Epidermis zbytku plodu.

1 – buňky stomatálního chrániče, 2 – peristomatální buňky,

Epidermální buňky a 2–3 řady pod nimi ležících buněk jsou protáhlé v tangenciálním směru. Vnější stěna epidermálních buněk je silnější než zbytek. Kutikula je tenká, pokrytá voskovou vrstvou. 2–3 řady subepidermálních buněk mají slabě kolenchymatózní charakter. Směrem ke středu plodu se buněčné membrány ztenčují.

Průduchy jsou na zralých plodech vzácné a obvykle jsou deformované. Epidermis disku se od zbytku povrchu plodu liší menšími buňkami a přítomností dobře zachovalých průduchů. Průduchy jsou obklopeny 4–5 peristomatálními buňkami (anomocytární typ).

Mezokarp je reprezentován řídkým parenchymem, jehož buňky jsou barveny antokyany. Cévní svazky jsou velmi tenké, převážně spirálními cévami. Jsou zde drúzy oxalátu vápenatého, které jsou lokalizovány především v endokarpu.

Endokarp se skládá z velkého počtu silnostěnných, polygonálních, porézních buněk (sklereidů).

Obrázek 3 – Plody borůvek obecných

Fragmenty oplodí borůvek (400×). Drcený přípravek.
A – Fragmenty exokarpu; B – fragmenty endokarpu. 1 – kutikula, 2 – epidermální buňky; 3 – kolenchym, 4 – mezokarpové buňky, 5 – brachysklereidy mezokarpu, 6 – sklereidy endokarpu

Obrázek 4 – Plody borůvek obecných.

Fragmenty oplodí borůvek (400×).

A – Mezokarp plodu. Cévní svazky. B – Fragment endokarpu.
1 – buňky mezokarpu parenchymu, 2 – prstencové cévy; 3 – spirální cévy, 4 – tlustostěnné buňky (sklereidy); 5 – drúzy oxalátu vápenatého

Obrázek 5 – Plody borůvek obecných.

Semenný obal plodů borůvek (400×). A – Podélný řez; B – epidermis z povrchu. 1 – slizovité stěny epidermálních buněk semene; 2 – semenný obal; 3 – zhroucený parenchym semenného obalu; 4 – endosperm

Obrázek 6 – Plody borůvek obecných.

Borůvkové semeno. Embryo. А – Podélný řez (40×);
B – příčný řez (100×). 1 – semenný obal, 2 – endosperm, 3 – embryo, 4 – umístění embrya (na podélném řezu semene)

Semena se skládají ze semenného obalu, endospermu a embrya. Epidermis semenného obalu je dobře definovaná, zbývající buňky se hroutí. Epidermální buňky jsou podél semene prodlouženy, vnitřní a boční stěny jsou sklerifikované a prostoupené póry. Pouze vnější stěna epidermálních buněk je slizovitá. Endosperm je silný, embryo je malé. Buňky embrya a endospermu obsahují aleuronová zrna a mastný olej.

Definice hlavních skupin biologicky aktivních látek

Asi 2,0 g plodů se umístí do Erlenmeyerovy baňky s obroušeným spojem, přidá se 10 ml 96% lihu s obsahem 1% roztoku kyseliny chlorovodíkové, baňka se uzavře korkem a míchá se 30 minut. Extrakt se přefiltruje přes papírový filtr (zkoušený roztok).

Na startovní čáru analytické chromatografické desky s vrstvou silikagelu s fluorescenčním indikátorem na hliníkovém substrátu o rozměrech 10 × 15 cm se nanese 20 μl testovaného roztoku. Deska s naneseným vzorkem se suší na vzduchu a umístí se na 5 hodin do komory předem nasycené směsí rozpouštědel. н-butanol – ledová kyselina octová – voda (4:1:2) a chromatograficky se zpracuje vzestupným způsobem. Jakmile čelo rozpouštědla překročí asi 80 – 90 % délky destičky od startovní čáry, destička se vyjme z komory, suší se, dokud se neodstraní stopy rozpouštědel, a pozoruje se za denního světla.

Chromatogram testovaného roztoku by měl vykazovat fialovou adsorpční zónu a nad ní růžovou adsorpční zónu; detekce dalších adsorpčních zón je povolena.

1. 2. Když se do odvaru přidají 2 kapky 10% roztoku síranu železnato-amonného (kamenec železnato-amonný), vytvoří se černozelené zbarvení (taniny).

ZKOUŠKY

Vlhkost. Celá surovina – ne více než 14 %.

Popel obecný. Celá surovina – ne více než 3 %.

Popel, nerozpustný v kyselině chlorovodíkové. Celá surovina – ne více než 0,8 %.

Zahraniční záležitost

Ostatní části rostliny (listy, kousky stonků). Celá surovina – ne více než 0,25 %.

Plody jsou nezralé, tvrdé a spálené. Celá surovina – ne více než 1 %.

Organická nečistota. Celá surovina – ne více než 2 %.

Minerální nečistota. Celá surovina – ne více než 0,3 %.

Radionuklidy. V souladu s požadavky monografie Všeobecného lékopisu „Stanovení obsahu radionuklidů v léčivých rostlinných materiálech a léčivých rostlinných přípravcích“.

Mikrobiologická čistota. V souladu s požadavky monografie všeobecného lékopisu „Mikrobiologická čistota“.

kvantifikace. Celé suroviny: Množství antokyanů vypočtené jako kyanidin-3-glykosid není menší než 0,5 %.

Alkohol 60% obsahující kyselinu chlorovodíkovou
1%. Do 126 ml 96% lihu přidejte 5,5 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a objem roztoku doplňte vodou na 200 ml.

Analytický vzorek suroviny se rozemele na velikost částic procházejících sítem s otvory 3 mm. Asi 1,0 g (přesně naváženo) rozemleté suroviny se umístí do 250ml Erlenmeyerovy baňky se zábrusem, přidá se 50 ml 60% lihu s obsahem 1 % kyseliny chlorovodíkové. Baňka se uzavře zátkou a zváží s přesností ± 0,01 g, poté se připojí k zpětnému chladiči a zahřívá se 60 minut ve vroucí vodní lázni, poté se ochladí na pokojovou teplotu, uzavře se stejnou zátkou, znovu se zváží a chybějící extrakční činidlo se doplní 60% lihem s obsahem 1 % kyseliny chlorovodíkové. Extrakt se přefiltruje přes papírový filtr (roztok A).

Do odměrné baňky o objemu 1,0 ml se přidá 25 ml roztoku A, objem roztoku se doplní po rysku 96% lihem obsahujícím 1 % kyseliny chlorovodíkové a promíchá se (roztok B).

Optická hustota roztoku B se měří na spektrofotometru při vlnové délce 546 nm v kyvetě s tloušťkou vrstvy 10 mm. Jako srovnávací roztok se používá roztok sestávající z 1 ml 60% lihu, doplněný po rysku 96% lihem obsahujícím 1% kyseliny chlorovodíkové v odměrné baňce o objemu 25 ml.

Obsah sumy antokyanů v přepočtu na kyanidin-3-O-glykosid v absolutně suchých surovinách v procentech (Х) se vypočítá pomocí vzorce:

kde А – optická hustota roztoku B;

– specifická absorpční rychlost kyanidin-3-O-glykosidu

při vlnové délce 546 nm, což se rovná 600;

а – hmotnost surovin, g;