Co léčí květy pivoňky?

Byla vyvinuta metoda pro získání účinného antikoagulačního extraktu z kořenů Paeonia lactiflora. Podle několika koagulologických výzkumných metod (tromboelastografický, aktivovaný parciální tromboplastinový čas, trombinový a protrombinový čas) vykazoval extrakt z pivoňky vysoké antikoagulační vlastnosti. Byl rozluštěn mechanismus antikoagulačního účinku aktivního extraktu z pivoňky, který spočívá v inhibici aktivity enzymu trombinu, faktoru Xa a konečné fázi procesu srážení krve – vzniku fibrinové sraženiny. Bylo zjištěno, že extrakt z pivoňky prodlužuje celkovou koagulační konstantu a ovlivňuje elasticitu sraženiny, která odráží její hustotu. Extrakt lze v budoucnu použít jako netoxické antikoagulační léčivo, které nezpůsobuje vedlejší hemoragické účinky na organismus. Nízkomolekulární složky heparinu podobné extraktu z pivoňky mléčně kvetoucí jsou totožné s nízkomolekulárním heparinem živočišného původu.

antikoagulant
kořeny pivoňky lactiflora
mechanismus působení
1. Grinevič M.A. Informační vyhledávání nadějných léčivých rostlin. – L., 1990. – S. 25–28.

2. Lyapina L.A., Ammosova Y.M., Novikov V.S., Smolina T.Yu., Pastorova V.E., Uspenskaya M.S. K otázce povahy antikoagulantu získaného z kořenů pivoněk ve středním Rusku // Novinky Ruské akademie věd, ser. biologický. – 1997. – č. 2. – S. 235–237.

3. Lyapina L.A., Grigorieva M.E., Obergan T.Yu., Shubina T.A. Teoretické a praktické otázky studia funkčního stavu antikoagulačního krevního systému. – M.:Advanced Solutions, 2012. – 160 s.

4. Lyapina L.A., Kondashevskaya M.V., Pastorova V.E., Uspenskaya M.S., Novikov V.S. Antitrombotické účinky extraktu z kořenů pivoňky latiflora // Trombóza, hemostáza a reologie. – 2000. – č. 2 (2). – s. 37–39.

5. Registr léčiv RLS. Encyklopedie léků – 19. číslo. / Ed. G.L. Vyškovského. –M. “RLS-Media”. – 2010. – 1368 s.

6. Uspenskaya M.S., Murashev V.V., Krinitsina A. Stromové pivoňky v botanické zahradě Moskevské státní univerzity / Ed. Murasheva V.V. – M.: Lesní země, 2016. – 104 s.

7. Rabenstein DL Heparin a heparin sulfát: struktura a funkce // Nat. Prod. Rap. – 2002. – Vol.19. – S. 312–331.

8. Stief TW Inhibice trombinu v plazmě heparinem nebo argininem // Clin. Appl.thromg.hemost. – 2007. – Sv. 13. – č. 2. – S. 146–153.

Pivoňka mléčná (Paeonia lactiflora), bělokvětá nebo čínská, roste v Mongolsku, Číně, Primorye, Transbaikalia na svazích kopců, podél řek, v houštinách mongolského dubu. Největší počet bylinných pivoněk pocházel z mléčně kvetoucích pivoněk. Na rozdíl od jiných planě rostoucích bylinných pivoněk je P.lactiflora na jednom z prvních míst v odolnosti vůči suchu, mrazu a šedé hnilobě. Je široce používán v krajinářství a nálevy z oddenků jsou široce používány v čínské medicíně jako analgetikum, antikonvulzivum, antispasmodikum, protizánětlivé činidlo a činidlo normalizující krevní tlak [1,6]. Již dříve bylo prokázáno, že kořeny pivoňky obsahují složku podobnou heparinu s nízkou molekulovou hmotností (až 6 kDa) [2,4]. Je známo, že standardní heparin, získaný ze zvířecích tkání, zpomaluje procesy tvorby fibrinu díky svému inherentnímu antikoagulačnímu účinku [7,8]. V klinické praxi se používají vysoko nebo nízkomolekulární hepariny převážně živočišného původu. Vysokomolekulární heparin má však při předávkování vedlejší účinky ve formě trombocytopenie, „rebound effect“ nebo hemoragií [5]. Nízkomolekulární formy heparinů tyto negativní účinky na organismus prakticky nemají, většinou jsou však zahraniční výroby. Stále probíhá hledání bezpečných domácích antikoagulancií bez vedlejších negativních účinků na organismus. Taková antikoagulancia mohou zahrnovat látky rostlinného původu. Proto je problém studia antikoagulancií rostlinného původu a studia mechanismu jejich působení na srážlivost krve aktuální i dnes.

účel práce bylo vyvinout optimální metodu pro získání extraktu z kořenů Paeonia lactiflora, prostudovat jeho vliv na různé části hemostázy a rozluštit možné mechanismy jeho antikoagulačního účinku.

Materiály a metody výzkumu

Použili jsme čerstvé kořeny pivoňky lactiflora (PMP), pěstované v botanické zahradě Moskevské státní univerzity Lomonosova. Vyvinuli jsme nejoptimálnější metodu pro získání antikoagulačního extraktu z CPM, u kterého byly kořeny omyty vodou z vodovodu, sušeny 37 hodin při 24 C, zbaveny kůry a suché jádro bylo rozdrceno v porcelánovém hmoždíři min. 20–30 minut. Dále bylo léčivo zváženo a 5% roztok NaCl byl použit k získání jeho počátečního 0,85% roztoku. Po 20–24 hodinách stání pivoňkového roztoku při 37 °C byl roztok podroben centrifugaci po dobu 10 minut při 3000 ot./min. Supernatant (extrakt) byl použit v dalších experimentech.

Vliv získaného extraktu z pivoňky (EP) na hemostaziologické parametry [3] byl studován in vitro, kdy byl EP přidán do krve nebo plazmy rychlostí 0.3 ml krve nebo plazmy 0.02 ml EP. Tyto roztoky byly inkubovány po dobu alespoň 3-5 minut a na přístroji Hellige (Německo) byly zaznamenány následující parametry tromboelastografie (TEG) – „R“ (fáze tvorby tromboplastinu a trombinu), „K“ (fáze tvorby fibrinu ), „ma“ (maximální amplituda, indikující změnu /zvýšení nebo snížení/ koncentrace fibrinogenu), „t“ (pokud je prodlouženo, znamená aktivaci antikoagulační aktivita), „S“ (konstanta synereze = R + t, označuje zhutnění sraženiny). „T“ (celková koagulační konstanta), „E“ (elasticita sraženiny, odrážející hustotu sraženiny). Kromě toho byl analyzátor krevní koagulace ASKa-2-01 ASTRA (Rusko) použit ke stanovení protrombinového času (PT), trombinového času (TT) a aktivovaného parciálního tromboplastinového času (APTT) [3] k charakterizaci vnějšího, vnitřního a obecného cesty koagulace krve. V experimentech jsme použili laboratorní bílé samce potkanů ​​o hmotnosti 180–200 g, kterým byla odebrána krev v. jugularis za použití 3.8% citrátu sodného jako konzervantu v poměru 9:1 (pro tromboelastografickou metodu), která byla následně centrifugujte při 2000 q po dobu 10–12 minut, abyste získali plazmu bez krevních destiček. Tato plazma byla použita ke stanovení APTT, PT a TV.

Statistické zpracování dat bylo provedeno podle Studentovy metody.

Výsledky výzkumu a diskuse

Bylo zjištěno, že EP v počáteční koncentraci 5 % ve všech testech vykazuje významnou antikoagulační aktivitu, převyšující kontrolní hodnoty 1.8-2.6krát. Podle údajů TEG bylo ve srovnání s kontrolou zjištěno, že indikátor „R“ se prodlužuje 1.8krát, což ukazuje na inhibiční účinek EP na tvorbu trombinu a faktoru Xa, zatímco indikátor „K“ se prodlužuje o 2.6 krát, což za prvé ukazuje na výskyt hypokoagulace způsobené antitrombinovým potenciálem krve a za druhé na účast EP na prevenci tvorby fibrinové sraženiny. Indikátor „K“, jak je známo, závisí na koncentraci vytvořeného trombinu, koncentraci a funkční užitečnosti faktorů fibrinogenu a protrombinového komplexu, které jsou, soudě podle získaných výsledků, výrazně sníženy. Indikátor „T“ TEG v experimentálních vzorcích je rozšířen 2.27krát, což ukazuje na aktivaci antikoagulační aktivity krve pod vlivem EP. Synerezní konstanta, indikátor „S“ TEG, v experimentu překračuje kontrolní úroveň 2.3krát, tzn. Proces zhutňování sraženiny v experimentu probíhá mnohem pomaleji než u kontroly kvůli antikoagulačnímu účinku EP (tabulka).

Hemostasiologické parametry po inkubaci extraktu z pivoňky lactiflora s krví potkanů ​​(průměrné údaje ze 7 vzorků v každé skupině) (M±m)

Kontrola (0.85 % NaCl)

Experiment (5% extrakt z kořenů P.lactiflora)